如果稍有不慎，操作不合理的地方，會造成很多問題，影響了檢測的精度，大大降低了測試質量。如花板，假陽性，全彩色，全彩色，顏色空間的低。。。。。。這就要求我們在實驗過程做了總結，逐步完善，也就是學習，分享學習經驗。以下總結實驗和解決共同的問題，與你分享。

在設計ELISA復孔查看時(shi)，有客戶提出問題：

1，包是非常重要的，蛋白質濃度，原來的性質是否降解，抗體，使你可以識別，從而節省抗原是非常重要的，我做的重組蛋白，他嚴厲警告我必須在冰浴是緩慢的融化是真理。有一些涂層可不是蛋白質，我們的裝修之前涂，我簡要如下：第一載體，這種鍍膜的方法均勻，牢固，已擴大應用于各種抗原定量測定。ELISA試劑盒脂質：可以在有機溶劑（如酒精）孔加入溶解后，打開冰箱隔夜或冷干，待酒精揮發，在固體表面上進行自然干燥的固體脂質。小分子必須依靠和大的載體蛋白偶聯可以固定在固體載體上。

2，包(bao)衣(yi)液(ye)(ye)的(de)選(xuan)擇，碳酸(suan)鹽緩沖液(ye)(ye)通(tong)常(chang)選(xuan)擇9。6。但有時因(yin)為測(ce)試(shi)需求，數據包(bao)緩沖溶(rong)液(ye)(ye)是一種特殊的(de)原料可采用(yong)中性(xing)包(bao)裝。應注(zhu)意以(yi)下原則：蛋(dan)(dan)白(bai)質與聚苯乙烯固(gu)(gu)相載(zai)體是通(tong)過物理吸(xi)附(fu)結合(he)，取決于在(zai)固(gu)(gu)相的(de)疏水(shui)性(xing)基團和(he)疏水(shui)性(xing)相互作用(yong)的(de)載(zai)體表面蛋(dan)(dan)白(bai)分(fen)子的(de)結構，物理吸(xi)附(fu)是非特異性(xing)的(de)，蛋(dan)(dan)白(bai)分(fen)子量，等電點，大集中，小分(fen)子蛋(dan)(dan)白(bai)蛋(dan)(dan)白(bai)質通(tong)常(chang)含有疏水(shui)基團越多，所以(yi)更容易(yi)吸(xi)附(fu)在(zai)固(gu)(gu)相載(zai)體表面。測(ce)試(shi)也有很強的(de)理論于實踐，看最后一個可以(yi)應用(yong)到我們的(de)測(ce)試(shi)。除了剛才提(ti)到的(de)9。6碳酸(suan)鹽緩沖液(ye)(ye)常(chang)用(yong)的(de)涂料溶(rong)液(ye)(ye)，和(he)磷酸(suan)鹽緩沖液(ye)(ye)和(he)7-8 7。2 -緩沖。

3，關閉：以下包之后是(shi)無(wu)關的(de)(de)蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)質溶(rong)液濃(nong)度(du)高，涂層工藝。隨函(han)附上使(shi)大量不相(xiang)關的(de)(de)蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)質充填這(zhe)些(xie)空隙，和(he)干擾(rao)物(wu)質的(de)(de)免疫(yi)排斥和(he)吸附步(bu)驟(zou)。ELISA試劑(ji)盒常(chang)用的(de)(de)密(mi)封：0。05% - 0。5%牛血清(qing)白(bai)(bai)(bai)蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)；10%或1%明(ming)膠牛血清(qing)；脫(tuo)脂(zhi)奶粉，價格相(xiang)對(dui)低廉(lian)，可用于高濃(nong)度(du)（5%～10%）；和(he)一些(xie)罕見的(de)(de)使(shi)用各種(zhong)動物(wu)血清(qing)（主要是(shi)為(wei)了消(xiao)除類似的(de)(de)蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)和(he)酪(lao)蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)等干擾(rao)）。但到底選擇什么，根據(ju)實驗的(de)(de)具體實踐。

4，洗(xi)(xi)板：可以(yi)說(shuo)，在(zai)(zai)中(zhong)操作(zuo)，清洗(xi)(xi)是(shi)在(zai)(zai)主要的(de)(de)(de)(de)(de)(de)關鍵技術。由于聚(ju)苯乙(yi)烯等塑料(liao)對蛋白質的(de)(de)(de)(de)(de)(de)吸附是(shi)普遍存在(zai)(zai)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)，為了實現自(zi)由酶與客觀相結合的(de)(de)(de)(de)(de)(de)標記的(de)(de)(de)(de)(de)(de)分(fen)離，在(zai)(zai)板料(liao)孔中(zhong)殘留游離和吸附的(de)(de)(de)(de)(de)(de)非(fei)特異性干(gan)擾物(wu)質的(de)(de)(de)(de)(de)(de)去除，洗(xi)(xi)滌，并應(ying)將(jiang)干(gan)擾物(wu)質洗(xi)(xi)滌下(xia)來(lai)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)非(fei)特異性吸附。所(suo)以(yi)在(zai)(zai)洗(xi)(xi)衣(yi)板會(hui)有一定的(de)(de)(de)(de)(de)(de)誤差(cha)，非(fei)常人的(de)(de)(de)(de)(de)(de)因(yin)素（當然也(ye)有洗(xi)(xi)衣(yi)機除條件），是(shi)不(bu)(bu)完整的(de)(de)(de)(de)(de)(de)或弦清孔，系(xi)統(tong)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)影(ying)響是(shi)如此敏感，但(dan)不(bu)(bu)小。5，加抗體（抗標本和兩個）：注意的(de)(de)(de)(de)(de)(de)槍(qiang)頭，槍(qiang)頭。樣品用稀釋稀釋，也(ye)可以(yi)用稀釋的(de)(de)(de)(de)(de)(de)閉(bi)解。如果要添(tian)加兩個電阻，但(dan)也(ye)要注意兩個反工作(zuo)濃度的(de)(de)(de)(de)(de)(de)廢物(wu)，太高，太低(di)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)光的(de)(de)(de)(de)(de)(de)顏色。

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