ELISA(酶(mei)聯免疫(yi)吸(xi)附試(shi)(shi)驗(yan)(yan))是目(mu)前臨床上常用(yong)的(de)免疫(yi)學檢(jian)驗(yan)(yan)方法,由于(yu)其試(shi)(shi)劑(ji)穩定,易保存,操(cao)(cao)作簡(jian)便,結果判斷較客(ke)觀,既(ji)適宜于(yu)大(da)規模(mo)篩(shai)查試(shi)(shi)驗(yan)(yan),又可用(yong)于(yu)少量(liang)標本(ben)的(de)檢(jian)測,既(ji)可以做(zuo)定性(xing)試(shi)(shi)驗(yan)(yan)也可以做(zuo)定量(liang)分(fen)析,目(mu)前已廣泛用(yong)于(yu)微生(sheng)物(wu)學,寄(ji)生(sheng)蟲學,腫瘤學和細胞因(yin)子檢(jian)測等領域.EUSA有(you)敏感(gan)性(xing)高,特異性(xing)強,重復(fu)性(xing)好(hao)的(de)特點,但其同時存在影響因(yin)素多的(de)不足,現(xian)就實驗(yan)(yan)操(cao)(cao)作中常見的(de)影響因(yin)素進(jin)行分(fen)析實驗(yan)(yan),以提高ELASA的(de)實驗(yan)(yan)質量(liang).

洗滌在ELISA過(guo)程中(zhong)(zhong)(zhong)不是(shi)反(fan)(fan)應聚，但卻是(shi)決定(ding)實(shi)驗成(cheng)敗的(de)關(guan)鍵。洗(xi)滌的(de)目(mu)的(de)是(shi)洗(xi)去反(fan)(fan)應液中(zhong)(zhong)(zhong)沒(mei)有(you)與固(gu)(gu)相(xiang)抗原或(huo)抗體結合的(de)物質以及在(zai)(zai)反(fan)(fan)應過(guo)程中(zhong)(zhong)(zhong)非(fei)特異(yi)性(xing)吸附于固(gu)(gu)相(xiang)載(zai)體的(de)干擾物質。聚苯乙(yi)烯待塑料對(dui)蛋白質的(de)吸附作用是(shi)普(pu)遍性(xing)的(de)。因此在(zai)(zai) ELISA 測(ce)定(ding)的(de)反(fan)(fan)應過(guo)程中(zhong)(zhong)(zhong)應盡(jin)量避免非(fei)特異(yi)性(xing)吸附，而在(zai)(zai)洗(xi)滌時又應把這種(zhong)非(fei)特異(yi)性(xing)吸附的(de)干擾物質洗(xi)滌下來。在(zai)(zai)標本和(he)(he)結合物的(de)稀釋液和(he)(he)洗(xi)滌液中(zhong)(zhong)(zhong)加入聚山(shan)梨(li)酯（吐(tu)溫，Tween）一(yi)類物質即(ji)右達到此目(mu)的(de)。聚山(shan)梨(li)酯是(shi)聚氧(yang)乙(yi)烯去水山(shan)梨(li)醇脂肪酸酯，為非(fei)離(li)子型的(de)表面張力(li)物質，常(chang)作為助溶(rong)劑(ji)。根據(ju)脂肪酸的(de)種(zhong)類而對(dui)聚山(shan)梨(li)酯編號，結合月(yue)桂酸的(de)為聚山(shan)梨(li)酯20，在(zai)(zai)ELISA中(zhong)(zhong)(zhong)為常(chang)用。它的(de)洗(xi)滌效果好，并(bing)具有(you)減少(shao)非(fei)特異(yi)性(xing)吸附和(he)(he)增強(qiang)抗原抗體結合的(de)作用。

洗(xi)(xi)滌如(ru)不成功，特別(bie)在后一次，如(ru)有酶結合物(wu)的非(fei)特異性吸附，將使空(kong)白值升高。另外，在間接法中如(ru)血清(qing)標本內(nei)的非(fei)特異性IgG吸附在固相(xiang)上(shang)而(er)未被洗(xi)(xi)凈，也將與酶標抗體作用而(er)產生干擾。

ELISA板的洗滌一(yi)般可采用以下方法(fa):

①吸干孔內反應液。

②將(jiang)洗滌(di)液注滿板孔。

③放置(zhi)2 min，略作搖動。

④吸干(gan)(gan)孔內(nei)液，也可(ke)傾去液體(ti)后在吸水紙上(shang)拍(pai)干(gan)(gan)。洗滌(di)的次(ci)數一般為(wei)3~4次(ci)，有時甚至需(xu)洗5~6次(ci)。