ELISA檢測試劑盒如何避免(mian)假(jia)陽(yang)性現象。

1、加樣

對(dui)于間接(jie)進口(kou)ELISA檢(jian)測試劑盒(he)標本(ben)一(yi)般都要(yao)進行稀(xi)釋，如(ru)果加(jia)(jia)樣不(bu)準就會造成誤(wu)差，尤其(qi)當(dang)稀(xi)釋倍數大時，很小的(de)絕對(dui)誤(wu)差，會導致較大的(de)相(xiang)對(dui)誤(wu)差，使陰性（或弱(ruo)陽性）標本(ben)呈陽性（或陰性）。加(jia)(jia)樣時應將(jiang)所加(jia)(jia)物加(jia)(jia)在ELISA板孔(kong)的(de)底(di)部，避免(mian)加(jia)(jia)在孔(kong)壁上部，并注(zhu)意不(bu)可濺出(chu)，不(bu)可產生氣泡。目前，大部分(fen)血站都已使用(yong)全自動酶免(mian)加(jia)(jia)樣系統(tong)處理標本(ben)，可較好地避免(mian)以(yi)上誤(wu)差。

2、洗滌

在進(jin)口ELISA檢測(ce)試劑(ji)盒中(zhong)正確(que)的(de)洗滌(di)(di)是(shi)(shi)保證得到(dao)可重(zhong)復(fu)結(jie)(jie)果(guo)的(de)關健一步，應引起操作者重(zhong)視。無(wu)論是(shi)(shi)手工操作還是(shi)(shi)機器操作，得出不正確(que)的(de)結(jie)(jie)果(guo)常與不正確(que)的(de)洗滌(di)(di)有關，ELISA就是(shi)(shi)靠洗滌(di)(di)來達到(dao)分離游離和結(jie)(jie)合的(de)酶標(biao)記物(wu)的(de)目(mu)的(de)。通過洗滌(di)(di)以消(xiao)除殘留在板孔(kong)中(zhong)沒能與固體(ti)抗原或抗體(ti)結(jie)(jie)合的(de)物(wu)質(zhi)(zhi)，以及在反應過程中(zhong)非特(te)異性吸附于固相(xiang)載體(ti)的(de)干擾物(wu)質(zhi)(zhi)。

3、 溫育

每種(zhong)試(shi)劑都有其(qi)*合適(shi)的(de)反應(ying)模式，其(qi)中溫(wen)度(du)和溫(wen)育(yu)(yu)時間(jian)(jian)控(kong)制(zhi)是重要(yao)因(yin)素。因(yin)孵育(yu)(yu)溫(wen)度(du)高(gao)(gao)，反應(ying)時間(jian)(jian)長，會造成整板(ban)本(ben)底高(gao)(gao)，陽性率高(gao)(gao)。溫(wen)育(yu)(yu)一般(ban)用(yong)濕(shi)盒或(huo)水浴(yu)，反應(ying)板(ban)不宜(yi)疊放，以保(bao)證(zheng)各板(ban)溫(wen)度(du)都能(neng)迅速平衡，為避免蒸發(fa)，板(ban)上應(ying)加蓋。

4、酶標儀判讀

作為(wei)記錄測定(ding)(ding)結(jie)(jie)果(guo)的(de)儀器，酶(mei)標(biao)儀的(de)性能(neng)穩定(ding)(ding)與否，決定(ding)(ding)結(jie)(jie)果(guo)的(de)可(ke)靠度。首先酶(mei)標(biao)儀應定(ding)(ding)期進行保養，對濾光(guang)片要定(ding)(ding)期校正(zheng)(zheng)；其次(ci)酶(mei)標(biao)儀波長設(she)置要正(zheng)(zheng)確，使用(yong)雙波長，一個檢測波長，一個參(can)比波長，以消除(chu)微孔板底部(bu)劃(hua)痕(hen)、不(bu)平、指印(yin)或液面(mian)高(gao)度差異造成(cheng)的(de)光(guang)干擾。此外，在用(yong)酶(mei)標(biao)儀讀數時先擦試微孔板底部(bu)并壓平板條。由于(yu)各種酶(mei)標(biao)儀性能(neng)有所不(bu)同(tong)，使用(yong)中應詳細閱讀說明書

由(you)于酶(mei)聯免(mian)疫吸(xi)附(fu)技術目前在技術上(shang)(shang)缺乏標準(zhun)化，盡管目前國際上(shang)(shang)以及我(wo)國有了部分(fen)標準(zhun)血清或參比(bi)血清（血清盤）。但(dan)由(you)于受方法(fa)學及技術條(tiao)件的(de)限(xian)制，在酶(mei)聯吸(xi)附(fu)測(ce)定(ding)中(zhong)有時不可避免(mian)的(de)會出(chu)現一(yi)定(ding)的(de)非(fei)特異(yi)(yi)性，但(dan)我(wo)們可以通過以上(shang)(shang)措施把非(fei)特異(yi)(yi)性顯色降至(zhi)限(xian)底，從而提高檢(jian)測(ce)的(de)特異(yi)(yi)性，并得(de)到更(geng)準(zhun)確、可靠的(de)實驗結果。