ELISA檢測試劑盒的結果判定分為定性和(he)定量兩(liang)種 ，在間(jian)接(jie)法(fa)(fa)(fa)和(he)夾(jia)心法(fa)(fa)(fa)ELSIA中，陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法(fa)(fa)(fa)ELISA中則(ze)相反，陰性孔呈色深于陽性孔。那么兩(liang)類結果如何判斷呢？南京森貝伽生(sheng)物技(ji)術為您解析(xi)： 
（1）間接法(fa)和夾心(xin)法(fa)
這類反應(ying)(ying)的(de)(de)(de)定(ding)性(xing)(xing)結(jie)果(guo)可以用(yong)肉眼判(pan)斷。目視標本(ben)(ben)也(ye)無色或近于無色者判(pan)為(wei)陰性(xing)(xing)，顯(xian)色清晰(xi)者為(wei)陽性(xing)(xing)。但(dan)在ELSIA中，正常(chang)人(ren)血清反應(ying)(ying)后常(chang)可出現呈色的(de)(de)(de)本(ben)(ben)底，此本(ben)(ben)底的(de)(de)(de)深淺(qian)因試劑的(de)(de)(de)組成(cheng)和實驗(yan)的(de)(de)(de)條件(jian)不同而異，因此實驗(yan)中必(bi)須加測陰性(xing)(xing)對(dui)照(zhao)(zhao)。陰性(xing)(xing)對(dui)照(zhao)(zhao)的(de)(de)(de)組成(cheng)應(ying)(ying)為(wei)不含受(shou)檢物(wu)的(de)(de)(de)正常(chang)血清或類似物(wu)。在用(yong)肉眼判(pan)斷結(jie)果(guo)時，更(geng)宜用(yong)顯(xian)色深于陰性(xing)(xing)對(dui)照(zhao)(zhao)作為(wei)標本(ben)(ben)陽性(xing)(xing)的(de)(de)(de)指標。
目視(shi)法簡捷明(ming)了，但(dan)頗具主觀性(xing)。在(zai)條(tiao)件許可(ke)下，應(ying)該用比色計(ji)測定(ding)吸(xi)(xi)光值，這(zhe)樣可(ke)以得(de)到客觀的數據(ju)。先(xian)讀出標本（sample，S）、陽性(xing)對(dui)照(zhao)（P）、和陰性(xing)對(dui)照(zhao)（N）的吸(xi)(xi)光值，然后進行計(ji)算。計(ji)算方法有多種，大致可(ke)分為陽性(xing)判定(ding)值法和標本與陰性(xing)對(dui)照(zhao)比值法兩類。
a．陽性判定值 
陽性(xing)判定值（cut-off value）一(yi)般為(wei)陰(yin)性(xing)對照A值加上一(yi)個特定的常數，以(yi)此作(zuo)為(wei)判斷結果陽性(xing)或(huo)陰(yin)性(xing)的標(biao)準。
用(yong)(yong)此法判(pan)斷結果要求實(shi)驗(yan)條(tiao)件十分恒定(ding)(ding)(ding)，試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)的(de)(de)(de)制備必須標(biao)(biao)準化，陽(yang)(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)(xing)和陰(yin)(yin)(yin)性(xing)(xing)(xing)(xing)的(de)(de)(de)對(dui)照(zhao)(zhao)(zhao)(zhao)品應(ying)符合一(yi)定(ding)(ding)(ding)的(de)(de)(de)規格(ge)，須配(pei)用(yong)(yong)精密的(de)(de)(de)儀器，并嚴(yan)格(ge)按規定(ding)(ding)(ding)操作。陽(yang)(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)(xing)判(pan)定(ding)(ding)(ding)值(zhi)(zhi)(zhi)公式(shi)中(zhong)的(de)(de)(de)常數(shu)(shu)是在這特定(ding)(ding)(ding)的(de)(de)(de)系(xi)統中(zhong)通過對(dui)大量標(biao)(biao)本的(de)(de)(de)實(shi)驗(yan)檢測而(er)得到(dao)的(de)(de)(de)。現(xian)舉某種檢測HBsAg的(de)(de)(de)試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)盒為(wei)例。試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)盒中(zhong)的(de)(de)(de)陰(yin)(yin)(yin)性(xing)(xing)(xing)(xing)對(dui)照(zhao)(zhao)(zhao)(zhao)品為(wei)不含HBsAg的(de)(de)(de)復(fu)鈣人(ren)血漿(jiang)，陽(yang)(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)(xing)對(dui)照(zhao)(zhao)(zhao)(zhao)品HBsAg的(de)(de)(de)含量標(biao)(biao)明(ming)為(wei)P=9±2ng/ml。每(mei)次試(shi)(shi)(shi)驗(yan)設2個(ge)(ge)陽(yang)(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)(xing)對(dui)照(zhao)(zhao)(zhao)(zhao)和3個(ge)(ge)陰(yin)(yin)(yin)性(xing)(xing)(xing)(xing)對(dui)照(zhao)(zhao)(zhao)(zhao)。測得A值(zhi)(zhi)(zhi)后，先計(ji)算陰(yin)(yin)(yin)性(xing)(xing)(xing)(xing)對(dui)照(zhao)(zhao)(zhao)(zhao)A值(zhi)(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)平均(jun)數(shu)(shu)（NCX）和陽(yang)(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)(xing)對(dui)照(zhao)(zhao)(zhao)(zhao)A值(zhi)(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)平均(jun)數(shu)(shu)（PCX），兩個(ge)(ge)平均(jun)數(shu)(shu)的(de)(de)(de)差（P-N）必須大于一(yi)個(ge)(ge)特定(ding)(ding)(ding)的(de)(de)(de)數(shu)(shu)值(zhi)(zhi)(zhi)（例0.400），試(shi)(shi)(shi)驗(yan)才(cai)有(you)(you)效(xiao)。3個(ge)(ge)陰(yin)(yin)(yin)性(xing)(xing)(xing)(xing)對(dui)照(zhao)(zhao)(zhao)(zhao)A值(zhi)(zhi)(zhi)均(jun)應(ying)≥0.5×NCX，并≤1.5×NCX，如(ru)其中(zhong)之一(yi)超出此范圍(wei)，則棄去(qu)，而(er)已另兩個(ge)(ge)陰(yin)(yin)(yin)性(xing)(xing)(xing)(xing)對(dui)照(zhao)(zhao)(zhao)(zhao)重新計(ji)算NCX；如(ru)有(you)(you)兩個(ge)(ge)陰(yin)(yin)(yin)性(xing)(xing)(xing)(xing)對(dui)照(zhao)(zhao)(zhao)(zhao)A值(zhi)(zhi)(zhi)超出以上范圍(wei)，則該(gai)次實(shi)驗(yan)無(wu)效(xiao)。陽(yang)(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)(xing)判(pan)定(ding)(ding)(ding)值(zhi)(zhi)(zhi)按下式(shi)計(ji)算：陽(yang)(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)(xing)判(pan)定(ding)(ding)(ding)值(zhi)(zhi)(zhi)=NCX+0.05，標(biao)(biao)本A值(zhi)(zhi)(zhi)＞陽(yang)(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)(xing)判(pan)定(ding)(ding)(ding)值(zhi)(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)為(wei)陽(yang)(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)(xing)，小于陽(yang)(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)(xing)判(pan)定(ding)(ding)(ding)值(zhi)(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)為(wei)陰(yin)(yin)(yin)性(xing)(xing)(xing)(xing)。應(ying)注(zhu)意(yi)的(de)(de)(de)是，式(shi)中(zhong)0.05為(wei)該(gai)試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)盒的(de)(de)(de)常數(shu)(shu)，只適合于該(gai)特定(ding)(ding)(ding)條(tiao)件下，而(er)不是對(dui)各種試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)均(jun)可通用(yong)(yong)。
根(gen)據以上敘述可以看出，在這種方法中陰性對(dui)照和(he)陽性對(dui)照也起到試(shi)驗(yan)(yan)的(de)質(zhi)(zhi)控作(zuo)用，試(shi)劑變質(zhi)(zhi)和(he)操作(zuo)不(bu)當均會產生"試(shi)驗(yan)(yan)無效"的(de)后果。
b.標本/陰(yin)性(xing)對照比值(zhi) 
在實驗條件（包(bao)括試劑）較(jiao)難保(bao)證恒(heng)定(ding)的(de)情況下(xia)，ELISA檢測試劑盒這種判斷法較為(wei)(wei)(wei)合(he)適。在得(de)出(chu)標(biao)本（S）和陰性(xing)(xing)對照(zhao)（N）的(de)(de)(de)A值(zhi)(zhi)后(hou)，計算(suan)S/N值(zhi)(zhi)。也有寫(xie)作(zuo)P/N的(de)(de)(de)，這里(li)的(de)(de)(de)P不代表(biao)陽性(xing)(xing)（positive），而是病人（patient）的(de)(de)(de)縮寫(xie)，不應(ying)(ying)誤解(jie)。為(wei)(wei)(wei)避免混淆(xiao)，更(geng)(geng)宜用S/N表(biao)示。在早期的(de)(de)(de)間接法ELISA中，有些作(zuo)者(zhe)定(ding)出(chu)S/N為(wei)(wei)(wei)陽性(xing)(xing)標(biao)準，現(xian)多(duo)為(wei)(wei)(wei)各種測(ce)定(ding)所沿用。實際上每一(yi)測(ce)定(ding)系統應(ying)(ying)該用實驗求出(chu)各自的(de)(de)(de)S/N的(de)(de)(de)閾值(zhi)(zhi)。更(geng)(geng)應(ying)(ying)注意的(de)(de)(de)是，N所代表(biao)的(de)(de)(de)陰性(xing)(xing)對照(zhao)是不含受檢物質(zhi)的(de)(de)(de)人血(xue)(xue)清。有的(de)(de)(de)試劑盒中所設陰性(xing)(xing)對照(zhao)為(wei)(wei)(wei)不含蛋白質(zhi)或(huo)蛋白質(zhi)含量較底的(de)(de)(de)緩沖(chong)液(ye)，以致反應(ying)(ying)后(hou)產生(sheng)的(de)(de)(de)本底可能較正常人血(xue)(xue)清的(de)(de)(de)本底低(di)得(de)多(duo)。因(yin)此，這類(lei)試劑盒規，如N<0.05（或(huo)其他數值(zhi)(zhi)），則(ze)按0.05計算(suan)，否則(ze)將出(chu)現(xian)假陽性(xing)(xing)結(jie)果。
（2）競爭法
在競(jing)爭(zheng)法(fa)ELISA中，陰(yin)性(xing)孔(kong)呈色深于陽性(xing)孔(kong)。陰(yin)性(xing)呈色的強(qiang)度取決于反應(ying)中酶(mei)結合物的濃(nong)度和加入競(jing)爭(zheng)抑制物的量，一(yi)般(ban)調節陰(yin)性(xing)對照的吸光度在1.0-1.5之間，此時反應(ying)zui為(wei)敏感。
競(jing)爭法ELISA不(bu)易用(yong)自視判斷結(jie)果，因肉眼很難(nan)辨(bian)別弱陽性反(fan)應(ying)與(yu)陰(yin)性對照(zhao)的顯色差異(yi)，一般均用(yong)比色計(ji)測定，讀出S、P和(he)N的吸(xi)光值。計(ji)算方法主要也有兩種，即陽性判定值法和(he)抑制率(lv)法。
ELISA試(shi)劑(ji)盒
a. 陽性判定值(zhi)法
與間接(jie)法和夾心法中的陽性(xing)判定值法基本相同，ELISA檢測試劑盒但在(zai)計算(suan)(suan)公式(shi)中(zhong)(zhong)引(yin)入陽(yang)性(xing)(xing)對(dui)(dui)(dui)照(zhao)(zhao)A值(zhi)(zhi)，現舉某種檢(jian)測抗HBc的(de)(de)(de)(de)試(shi)劑(ji)盒(he)為例。試(shi)劑(ji)盒(he)中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)(de)陰性(xing)(xing)對(dui)(dui)(dui)照(zhao)(zhao)為不含抗HBc的(de)(de)(de)(de)復鈣人血漿，陽(yang)性(xing)(xing)對(dui)(dui)(dui)照(zhao)(zhao)中(zhong)(zhong)抗HBc含量為125±100u/ml。每次試(shi)驗(yan)設(she)2個(ge)(ge)陽(yang)性(xing)(xing)對(dui)(dui)(dui)照(zhao)(zhao)和3個(ge)(ge)陰性(xing)(xing)對(dui)(dui)(dui)照(zhao)(zhao)。測得(de)A值(zhi)(zhi)后，先計算(suan)(suan)陰性(xing)(xing)對(dui)(dui)(dui)照(zhao)(zhao)A值(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)(de)平均(jun)值(zhi)(zhi)（NCX）和陽(yang)性(xing)(xing)對(dui)(dui)(dui)照(zhao)(zhao)A值(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)(de)平均(jun)數（PCX），兩個(ge)(ge)平均(jun)數的(de)(de)(de)(de)差(cha)（N-P）必須大于一個(ge)(ge)特定(ding)的(de)(de)(de)(de)數值(zhi)(zhi)（例如(ru)(ru)0.300）,試(shi)驗(yan)才有(you)效。3個(ge)(ge)陰性(xing)(xing)對(dui)(dui)(dui)照(zhao)(zhao)A值(zhi)(zhi)均(jun)應小(xiao)于2.000，而(er)且(qie)應≥0.5×NCX并≤1.5×NCX，如(ru)(ru)其中(zhong)(zhong)之一超(chao)出此范圍，則棄去，而(er)以另2個(ge)(ge)陰性(xing)(xing)對(dui)(dui)(dui)照(zhao)(zhao)重(zhong)新(xin)計算(suan)(suan)×NCX；如(ru)(ru)有(you)2個(ge)(ge)陰性(xing)(xing)對(dui)(dui)(dui)照(zhao)(zhao)A超(chao)出以上(shang)范圍，則該(gai)次實驗(yan)無(wu)效。陽(yang)性(xing)(xing)判(pan)定(ding)值(zhi)(zhi)按(an)下(xia)式(shi)計算(suan)(suan)：陰性(xing)(xing)判(pan)定(ding)值(zhi)(zhi)=0.4×NCX+0.6×PCX，標本A值(zhi)(zhi)≤陽(yang)性(xing)(xing)判(pan)定(ding)值(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)(de)反應為陽(yang)性(xing)(xing)，A＞陽(yang)性(xing)(xing)判(pan)定(ding)值(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)(de)反應為陰性(xing)(xing)。 
b. 抑制(zhi)率法 
抑制率表(biao)示標(biao)本在(zai)競爭結合中標(biao)本對陰性反應顯(xian)色的抑制程度(du)，按下式計算：
抑制(zhi)率（%）= （陰(yin)性(xing)對照A值(zhi)-標本A值(zhi)）×100%/陰(yin)性(xing)對照A值(zhi)，一(yi)般(ban)規(gui)定抑制(zhi)率≥50%為(wei)陽性(xing)，＜50%為(wei)陰(yin)性(xing)。