兔子腫瘤壞死因子αELISA試劑盒注意事項：

1）在收集(ji)標(biao)本(ben)前都必須有一個(ge)完整(zheng)的計劃，必須清楚要檢測的成份是否(fou)足(zu)夠穩(wen)定(ding)。

2）我(wo)們提倡新鮮標本盡(jin)早檢(jian)測，對收集(ji)后及時進行(xing)檢(jian)測。說明：

樣品類型： 標本必須為液體，不含沉(chen)淀(dian)。包括(kuo)血(xue)(xue)清(qing)(qing)、血(xue)(xue)漿(jiang)(jiang)、尿液、胸腹水、腦脊(ji)液、細(xi)胞培養上清(qing)(qing)、組織勻(yun)漿(jiang)(jiang)等。1ml的全血(xue)(xue)可得到(dao)0.5ml的血(xue)(xue)清(qing)(qing) 或(huo)血(xue)(xue)漿(jiang)(jiang)。每(mei)個標本量收集體積＝100ul×檢測種(zhong)類。取材(cai)前須向銷售人員(yuan)索要(yao)說明書。 

樣品(pin)采(cai)集(ji)(ji)(ji)： 收(shou)集(ji)(ji)(ji)標本(ben)前必須(xu)清楚要檢(jian)測(ce)的(de)成份是否足夠穩定(ding)。對收(shou)集(ji)(ji)(ji)后當天進行檢(jian)測(ce)的(de)標本(ben)，儲(chu)存(cun)(cun)在4℃備(bei)用，如有特殊原因(yin)需要周期(qi)收(shou)集(ji)(ji)(ji)標本(ben)， 將(jiang)標本(ben)及時分(fen)裝后放在-20℃或-70℃條件下保(bao)存(cun)(cun)。避(bi)免反復凍融。標本(ben)2-8℃可保(bao)存(cun)(cun)48小時，-20℃可保(bao)存(cun)(cun)1個月。-70度可保(bao)存(cun)(cun)6個月。部分(fen)激素類標本(ben)需添加(jia)抑(yi)肽酶。四、液體類標本(ben)：

包括血清、血漿、尿液、胸(xiong)腹水(shui)、腦脊液、細胞培養上清等。

1）血清：

室溫(wen)血液自(zi)然凝固10-20分鐘(zhong)(zhong)后(hou)，離(li)心20分鐘(zhong)(zhong)左(zuo)右（2000-3000轉/分）。仔細收集(ji)上清。保存過程中如有沉(chen)淀形成(cheng)，應(ying)再次(ci)離(li)心。

2）血漿：

應(ying)根據標本(ben)的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后(hou)，離心(xin)20分鐘左右(you)（2000-3000轉/分）。仔細(xi)收集上清(qing)。保(bao)存過程(cheng)中如有沉淀形成，應(ying)再次(ci)離心(xin)。

3）尿液：

用無(wu)菌管(guan)收(shou)集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔(zi)細收(shou)集上清(qing)。保存過程中如有沉淀(dian)形成(cheng)，應再次(ci)離心。胸腹(fu)水、腦脊液(ye)參(can)照(zhao)此實行(xing)。

4）細胞培養上清：

A、檢測分(fen)泌性的(de)成(cheng)份時，用無菌管收(shou)集。離心20分(fen)鐘左右(you)（2000-3000轉/ 分(fen)）。仔(zi)細收(shou)集上清(qing)。

B、檢測細胞(bao)(bao)內的成(cheng)份(fen)時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞(bao)(bao)懸液(ye)，細胞(bao)(bao)濃度達到(dao)100萬(wan)/ml左右。通(tong)過反復凍(dong)融，以(yi)使細胞(bao)(bao)破壞(huai)并 放出細胞(bao)(bao)內成(cheng)份(fen)。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保(bao)存過程中(zhong)如有沉淀形成(cheng)，應再次離心。

5）組織標本：

切割標(biao)本(ben)后(hou)，稱取(qu)重量(liang)。加入(ru)一(yi)(yi)定量(liang)的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保(bao)存備用。標(biao)本(ben)融化后(hou)仍(reng)然保(bao)持2-8℃的溫度。加入(ru)一(yi)(yi)定量(liang)的PBS（PH7.4），用手工或勻漿(jiang)器(qi)將(jiang)標(biao)本(ben)勻漿(jiang)充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清(qing)。分裝后(hou)一(yi)(yi)份待檢測，其余(yu)冷凍備用。