小鼠ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)以(yi)期(qi)給同行(xing)帶來一些啟發，提高試(shi)驗(yan)質量(liang)。以(yi)靈敏度較(jiao)(jiao)高、特異(yi)性較(jiao)(jiao)好的(de)特點在(zai)得到了廣泛的(de)應(ying)用，但操作中的(de)各(ge)個環(huan)節對試(shi)驗(yan)的(de)檢測效果影響較(jiao)(jiao)大，如不注意，有可(ke)能導致(zhi)顯色不全、花(hua)板等結果。將操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下，

下面分析試驗操作中可(ke)能影響結果的(de)原因(yin)，并給出(chu)相應的(de)解決辦法

一(yi)、選擇試劑

選擇質量優良的檢測(ce)試劑，嚴格(ge)按(an)照試劑說明(ming)書進行操作，操作前將試劑在(zai)室溫下平衡30-60分(fen)鐘。

二(er)、加樣

可(ke)能原因：

1)血(xue)清或(huo)血(xue)漿標本(ben)(ben)分(fen)離不好(hao)即進行加樣(yang)(yang); 2)手(shou)工(gong)操作中，加樣(yang)(yang)板過(guo)多造(zao)成加樣(yang)(yang)后(hou)放入孵箱前等(deng)待時(shi)(shi)間過(guo)長(特別是室(shi)內溫度較高時(shi)(shi)); 3)加完標本(ben)(ben)再加酶試劑(ji)時(shi)(shi)酶濺出(chu)孔(kong)外。

解決辦法：

1，標本為血清(qing)：將血液(ye)先(xian)自然存放1-2小時后(hou)，再用(yong)3000rmp離心15分鐘;標本為血漿：必須(xu)使用(yong)含抗凝劑的血液(ye)標本收集管，采(cai)血后(hou)必須(xu)立(li)即(ji)顛倒采(cai)血管混合(he)5-10次，放置一(yi)段時間后(hou)，3000rpm離心15分鐘;若(ruo)(ruo)在(zai)幾天(tian)內(nei)檢測，可放在(zai)2-8℃冰(bing)箱中，若(ruo)(ruo)要(yao)貯存，則置于-20℃的低(di)溫冰(bing)箱內(nei)。

2，加(jia)樣后及時放入孵(fu)箱。

3，加酶(mei)試劑后用吸(xi)水紙(zhi)在酶(mei)標板表面輕拭吸(xi)干。

4，如果采用AT或其他全自動加(jia)樣，選擇(ze)FAME或其他后處(chu)理儀器加(jia)酶試劑。

5，ELISA試劑盒標本較多時，請分批操作。

三、 孵育

可能(neng)原因：

1，孵育(yu)時未貼封片(pian)或加蓋(gai)，使標(biao)本或稀釋液蒸發，吸(xi)附于孔壁，難于清(qing)洗che底(di);

2，孵育時間人為延(yan)長，導(dao)致非特異性(xing)結合緊附于反應孔周圍，難以清洗che底(di)。

解決辦(ban)法(fa)：

1，貼封片或加蓋(gai);

2，按(an)說明(ming)步驟(zou)嚴格(ge)控(kong)制操作時間(jian)。

四、洗板

可能(neng)原因(yin)：

1，采用手(shou)工洗板，孔與孔之間液體交叉(cha)。

2，采用(yong)半自(zi)動洗(xi)板機洗(xi)板時(shi)，洗(xi)液(ye)量(liang)不足，導致洗(xi)板不che底(di);洗(xi)板針堵塞，抽(chou)吸不wan全;洗(xi)板不暢，導致洗(xi)板效果差。

3，反應板過多(duo)造成洗板等待(dai)時(shi)間長。

解決辦法：

1，ELISA試劑盒保證洗液注(zhu)滿各孔，洗板針暢通，洗完(wan)板后zui hao在吸(xi)水紙(選擇(ze)干凈、無或少(shao)塵(chen)的吸(xi)水材(cai)料)上輕輕拍干;

2，合理安排，或多(duo)用幾(ji)臺洗板機。

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