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實驗時，應分別以陽性對照與陰性對照控制實驗條件，待檢樣品應作一式二份，以確保實驗作用的準確性。有時本底較高，闡明有非特異性反應，可選用羊血清、兔血清或BSA等封閉。

 上海研(yan)域生物在(zai)當中，進行(xing)各項(xiang)實驗(yan)條件(jian)的(de)(de)選(xuan)擇是很(hen)重要的(de)(de)，其間包含：

1. 固(gu)相載(zai)體(ti)的選擇：許(xu)多物質可(ke)(ke)作為固(gu)相載(zai)體(ti)，如聚氯乙烯(xi)、聚苯乙烯(xi)、聚丙酰胺(an)和纖維(wei)素等(deng)。其(qi)(qi)方法可(ke)(ke)所以凹孔(kong)平板、試管、珠(zhu)粒等(deng)。現在常用的是(shi)40孔(kong)聚苯乙烯(xi)凹孔(kong)板。不管何(he)種載(zai)體(ti)，在運用前均(jun)可(ke)(ke)進(jin)行篩選：用等(deng)量抗(kang)原(yuan)包(bao)被，在同(tong)一實驗條(tiao)件(jian)下進(jin)行反(fan)應，調(diao)查其(qi)(qi)顯色反(fan)應是(shi)否(fou)均(jun)一性，據此判明(ming)其(qi)(qi)吸附(fu)功能(neng)是(shi)否(fou)良好。

2. 包被抗體(或(huo)抗原)的(de)選(xuan)擇：將(jiang)抗體(或(huo)抗原)吸(xi)附在(zai)固(gu)相載(zai)體外表時(shi)，要求純度(du)要好,吸(xi)附時(shi)一(yi)(yi)般要求PH在(zai)9.0～9.6之間。吸(xi)附溫度(du)，時(shi)間及其蛋(dan)白(bai)量也有(you)必(bi)定(ding)影響,一(yi)(yi)般多選(xuan)用(yong)(yong)4℃18～24小時(shi)。蛋(dan)白(bai)質(zhi)包被的(de)zui適濃度(du)需(xu)進行滴定(ding)：即用(yong)(yong)不同的(de)蛋(dan)白(bai)質(zhi)濃度(du)(0.1、1.0和10μg／ml等)進行包被后(hou)，在(zai)其它實驗條件相一(yi)(yi)同，調(diao)查陽(yang)性標本(ben)的(de)OD值。選(xuan)擇OD值最大而(er)蛋(dan)白(bai)量最少的(de)濃度(du)。關于(yu)多數蛋(dan)白(bai)質(zhi)來說一(yi)(yi)般為1～10μg／ml。

3. 酶(mei)(mei)符號(hao)抗(kang)體作業濃度的(de)選擇：首(shou)先用直接ELISA法進(jin)行(xing)開始效價(jia)的(de)滴定(ding)(見(jian)酶(mei)(mei)符號(hao)抗(kang)體部(bu)份)。然(ran)后再(zai)固(gu)定(ding)其它條(tiao)件或采納(na)“方陣法"(包被物、待檢樣品的(de)參(can)閱品及酶(mei)(mei)符號(hao)抗(kang)體分別為不同的(de)稀釋度)在正式實驗(yan)系統里準確地滴定(ding)其作業濃度。 

4. 酶的底物及(ji)供(gong)氫(qing)體的選(xuan)擇：對供(gong)氫(qing)體的選(xuan)擇要求是價廉(lian)、安全、有(you)(you)明顯(xian)地顯(xian)色反應，而本身無色。有(you)(you)些(xie)供(gong)氫(qing)體有(you)(you)潛在的致癌作用，應留意(yi)防(fang)護。有(you)(you)條件者應運用不(bu)致癌、靈敏(min)度高(gao)的供(gong)氫(qing)體，如TMB和ABTS是現(xian)在較為滿意(yi)的供(gong)氫(qing)體。ELISA試劑盒底(di)物(wu)作(zuo)用(yong)一段時間(jian)后，應(ying)參與強酸或強堿(jian)以停止反應(ying)。一般底(di)物(wu)作(zuo)用(yong)時間(jian)，以10-30分鐘為宜。底(di)物(wu)運用(yong)液(ye)有(you)必要新鮮配制，尤(you)其是H2O2在臨(lin)用(yong)前(qian)參與。 

上海(hai)研域生(sheng)物開工大喜，六(liu)(liu)六(liu)(liu)六(liu)(liu)，順(shun)(shun)風順(shun)(shun)水朝前走；開門大吉，八八八，恒發(fa)隆發(fa)發(fa)發(fa)發(fa)；開門大樂，九九九，好運財運到。祝你(ni)生(sheng)意興隆！