實驗結果的準確性：

　　在(zai)ELISA試劑(ji)盒中，進行(xing)各項實(shi)驗條件的(de)(de)選(xuan)(xuan)擇是(shi)(shi)很(hen)重要的(de)(de)，其(qi)中包(bao)括:(1) 固相(xiang)載(zai)體(ti)的(de)(de)選(xuan)(xuan)擇：許(xu)多物質可作為固相(xiang)載(zai)體(ti)，如聚(ju)氯(lv)乙烯(xi)、聚(ju)苯乙烯(xi)、聚(ju)丙酰(xian)胺(an)和(he)纖(xian)維(wei)素等(deng)。其(qi)形(xing)式可以是(shi)(shi)凹孔(kong)平(ping)板(ban)、ELISA試劑(ji)盒試管、珠粒(li)等(deng)。目前常用(yong)的(de)(de)是(shi)(shi)40孔(kong)聚(ju)苯乙烯(xi)(聚(ju)苯乙烯(xi)磺酸鈉)凹孔(kong)板(ban)。不管何種載(zai)體(ti)，在(zai)使用(yong)前均可進行(xing)篩(shai)選(xuan)(xuan)：用(yong)等(deng)量抗原包(bao)被，在(zai)同一實(shi)驗條件下進行(xing)反應(ying)，觀察其(qi)顯色反應(ying)是(shi)(shi)否均一性，據(ju)此(ci)判明其(qi)吸附性能是(shi)(shi)否良好。

　　(2) 包(bao)被(bei)抗體(ti)(或(huo)抗原)的選擇：將抗體(ti)(或(huo)抗原)吸(xi)(xi)附(fu)在(zai)固相(xiang)載體(ti)表面(mian)時(shi)，要(yao)求純度(du)要(yao)好,吸(xi)(xi)附(fu)時(shi)一(yi)(yi)般要(yao)求PH在(zai)9.0～9.6之間。吸(xi)(xi)附(fu)溫(wen)度(du)，時(shi)間及其蛋白量(liang)也有一(yi)(yi)定影(ying)響(xiang),一(yi)(yi)般多(duo)采用4℃ 18～24小時(shi)。蛋白質(zhi)包(bao)被(bei)的zui適(shi)濃(nong)度(du)需進行滴定：即用不同的蛋白質(zhi)濃(nong)度(du)(0.1、1.0和10μg/ml等)ELISA試(shi)劑盒進行包(bao)被(bei)后，在(zai)其它(ta)試(shi)驗(yan)條件相(xiang)同時(shi)，觀察陽性標本的OD值。對(dui)于多(duo)數蛋白質(zhi)來(lai)說通常為1～10μg/ml。

　　(3) 酶標記抗體(ti)工(gong)作濃(nong)度的(de)選擇：首先用直(zhi)接ELISA試劑(ji)盒法(fa)(fa)進行初步(bu)效(xiao)價的(de)滴(di)定(見酶標記抗體(ti)部份)。然后再固定其(qi)它條件(jian)或采取“方陣法(fa)(fa)"(包(bao)被物、待檢樣品的(de)參考品及酶標記抗體(ti)分別(bie)為不(bu)同的(de)稀釋度)在正式實驗系統里準確地滴(di)定其(qi)工(gong)作濃(nong)度。

(4) 酶的(de)(de)底(di)(di)物及供氫(qing)體(ti)的(de)(de)選擇(ze)：對供氫(qing)體(ti)的(de)(de)選擇(ze)要求(qiu)是(shi)價廉、安全(quan)、有明顯地顯色(se)反(fan)應(ying)(ying)，而(er)本身無色(se)。有些供氫(qing)體(ti)(如OPD等(deng))有潛在的(de)(de)致(zhi)癌作用，應(ying)(ying)注(zhu)意防護。不致(zhi)癌、靈敏度高的(de)(de)供氫(qing)體(ti)，如TMB和ABTS是(shi)目(mu)前較為滿(man)意的(de)(de)供氫(qing)體(ti)。底(di)(di)物作用一段時(shi)(shi)間(jian)后(hou)，應(ying)(ying)加入強酸(suan)或強堿以終止反(fan)應(ying)(ying)。通常(chang)底(di)(di)物作用時(shi)(shi)間(jian)，以10-30分鐘為宜(yi)。ELISA試劑(ji)盒底(di)(di)物使用液必須新鮮(xian)配制，尤其是(shi)H2O2在臨用前加入。

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