1. 試劑的選擇

通常所使用的ELISA試(shi)劑盒或其它(ta)試(shi)劑，必(bi)須注冊批準、批檢合格、臨床評估質量(liang)優良，并且(qie)均(jun)在有效期內(nei)使用。不(bu)(bu)同批號試(shi)劑組分不(bu)(bu)得混用，過(guo)期的試(shi)劑一律不(bu)(bu)得使用，首(shou)先提升實(shi)驗結果的可信度。

2. 大(da)鼠(shu)ELISA試(shi)劑盒樣品的(de)采集與保存

用于檢(jian)測的標本應(ying)保持新(xin)鮮(xian)，標本的采集(ji)應(ying)盡量(liang)避免溶血(xue)，因紅(hong)細胞破(po)裂(lie)可(ke)釋放過氧(yang)化物(wu)酶活性(xing)物(wu)質，干擾結(jie)果，會出現假陽性(xing);標本如(ru)果受細菌污染，會因菌體中含有內源性(xing)過氧(yang)化物(wu)酶而出現假陽性(xing); 混濁或有沉淀的血(xue)清樣品應(ying)離(li)心，待澄清后方可(ke)檢(jian)測，避免對(dui)結(jie)果造成影響。

用于(yu)HIV抗體(ti)檢測的(de)血清或血漿樣品(pin)應(ying)存放于(yu)-20°℃以下(xia)，短期(1周內)進行檢測的(de)樣品(pin)可存放于(yu)2°℃~8℃。融解時(shi)應(ying)上下(xia)顛倒充分混勻，動作(zuo)要輕緩(huan)，避免產(chan)生氣泡。同時(shi)應(ying)注意避免樣品(pin)反復(fu)凍融，否則會造成樣品(pin)抗體(ti)效價降(jiang)低，影響其結(jie)果(guo)。

3. 大鼠ELISA試劑盒加(jia)樣

加(jia)樣前應注(zhu)意將微孔(kong)板條從冷(leng)藏環(huan)境中取出(chu)放置室溫，待試劑(ji)平衡后(hou)方可使(shi)用，未用完(wan)者需放入有干燥劑(ji)的密封袋中保存。整個HIV抗體檢測(ce)必須符合(he)《全國(guo)艾滋病檢測(ce)技術規范》，嚴格防止交叉感染。操作時必須戴(dai)手套、穿工(gong)作衣，嚴格執行消毒隔離制度(du)。

加樣(yang)要(yao)用微量(liang)移液器(要(yao)求(qiu)準確性高(gao)并定期(qi)進行校正)，按規定的(de)量(liang)加入孔內(nei)，避免(mian)(mian)加在孔壁的(de)邊緣，垂直加樣(yang)，不(bu)(bu)要(yao)使(shi)吸頭(tou)碰到(dao)酶標(biao)板孔上的(de)已包被的(de)抗原，加樣(yang)時(shi)盡(jin)量(liang)慢吸快放，同時(shi)注意不(bu)(bu)要(yao)濺(jian)出，避免(mian)(mian)產生氣泡。

每次加樣(yang)都(dou)要更換吸(xi)頭(tou)(tou)，做到一(yi)樣(yang)一(yi)吸(xi)頭(tou)(tou)，防止(zhi)發(fa)生交叉污染，干(gan)吸(xi)頭(tou)(tou)預(yu)先(xian)在血(xue)清中(zhong)抽吸(xi)3次，以(yi)便保(bao)證加樣(yang)量(liang)的準確性。滴(di)加試劑應先(xian)將(jiang)滴(di)瓶搖勻后再進行(xing)滴(di)加，以(yi)免(mian)產(chan)生氣(qi)泡。

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