細胞培養

一、準備工作
準(zhun)備工作(zuo)的(de)內容(rong)包(bao)括(kuo)器皿的(de)清洗、干燥與(yu)(yu)消毒，培(pei)養基與(yu)(yu)其(qi)他試劑的(de)配(pei)制(zhi)、分裝及滅菌(jun)，無菌(jun)室或超凈臺的(de)清潔與(yu)(yu)消毒，培(pei)養箱及其(qi)他儀器的(de)檢查與(yu)(yu)調試等。

二、取材
在無菌環境下從機體(ti)(ti)取出某種(zhong)組(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)細(xi)胞(bao)，經(jing)過一(yi)定的(de)(de)(de)處(chu)理(li)(li)后接入培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)器血中，這(zhe)一(yi)過程稱(cheng)為取材。如是細(xi)胞(bao)株的(de)(de)(de)擴大培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)則無取材這(zhe)一(yi)過程。機體(ti)(ti)取出的(de)(de)(de)組(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)細(xi)胞(bao)的(de)(de)(de)初次培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)稱(cheng)為原代培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)。理(li)(li)論上講(jiang)各種(zhong)動物(wu)和人(ren)體(ti)(ti)內的(de)(de)(de)所有組(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)都(dou)可(ke)以用于(yu)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)，實際上幼(you)體(ti)(ti)組(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)比(bi)成(cheng)年個體(ti)(ti)的(de)(de)(de)組(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)容易(yi)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)，分(fen)(fen)化程度(du)低的(de)(de)(de)組(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)比(bi)分(fen)(fen)化高的(de)(de)(de)容易(yi)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)。取材后應(ying)(ying)立即處(chu)理(li)(li)，盡快培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)，因故不能馬(ma)上培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)時，可(ke)將組(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)塊(kuai)切成(cheng)黃豆(dou)般大的(de)(de)(de)小塊(kuai)，置4℃的(de)(de)(de)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)液(ye)中保存(cun)。取組(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)時應(ying)(ying)嚴格保持無菌，同時也要避免(mian)接觸其他的(de)(de)(de)有害(hai)物(wu)質。取病理(li)(li)組(zu)(zu)織(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)和皮膚及消化道上皮細(xi)胞(bao)時容易(yi)帶菌，為減少污染可(ke)用抗菌素處(chu)理(li)(li)。

三、培養
將取(qu)得的(de)(de)組織細(xi)胞接入培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)或培(pei)(pei)養(yang)(yang)板(ban)中的(de)(de)過程稱(cheng)為(wei)培(pei)(pei)養(yang)(yang)。如(ru)系(xi)組織塊培(pei)(pei)養(yang)(yang)，則(ze)直(zhi)(zhi)接將組織塊接入培(pei)(pei)養(yang)(yang)器(qi)皿(min)底部(bu)，幾(ji)個小時后(hou)組織塊可貼(tie)牢在底部(bu)，再加(jia)(jia)入培(pei)(pei)養(yang)(yang)基。如(ru)系(xi)細(xi)胞培(pei)(pei)養(yang)(yang)，一般應在接入培(pei)(pei)養(yang)(yang)器(qi)皿(min)之前(qian)進行細(xi)胞計數，按要求以(yi)一定的(de)(de)量(liang)（以(yi)每毫(hao)升細(xi)胞數表示）接入培(pei)(pei)養(yang)(yang)器(qi)皿(min)并直(zhi)(zhi)接加(jia)(jia)入培(pei)(pei)養(yang)(yang)基。細(xi)胞進入培(pei)(pei)養(yang)(yang)器(qi)皿(min)后(hou)，立即放(fang)入培(pei)(pei)養(yang)(yang)箱中，使(shi)細(xi)胞盡早進入生(sheng)長狀態。

正(zheng)在培(pei)(pei)養中(zhong)的(de)細胞(bao)應每隔一(yi)定(ding)時(shi)(shi)間觀(guan)察一(yi)次，觀(guan)察的(de)內(nei)容(rong)包括細胞(bao)是否(fou)(fou)生(sheng)長良好，形態是否(fou)(fou)正(zheng)常，有(you)無污染(ran)，培(pei)(pei)養基的(de)PH 是否(fou)(fou)太酸或太堿（由酚紅指示劑指示），此外對(dui)培(pei)(pei)養溫度和CO2 濃度也要(yao)定(ding)時(shi)(shi)檢查。

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以上是細胞培養需注意哪些過程