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血清的保存應該注意以(yi)下幾點:
1、需要長期保存的血清必須儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中,4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發生污染或玻璃瓶凍裂。
2、熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已*解凍的血清,加熱過程中須規則搖晃均勻,此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活。除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質量。
補(bu)體參與(yu)反應有:細(xi)胞毒作用, 平滑(hua)肌細(xi)胞收縮, 肥(fei)大細(xi)胞和(he)血小(xiao)板釋放組胺, 增強吞噬(shi)作用, 促進(jin)淋巴細(xi)胞和(he)巨噬(shi)細(xi)胞發生(sheng)化學趨化和(he)活化。
3、瓶裝(zhuang)血清解(jie)凍需采(cai)用逐步解(jie)凍法:-20℃ 至 -70℃ 低(di)溫(wen)冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解(jie)1天(tian)。然后移入室溫(wen),待全部溶解(jie)后再分裝(zhuang)。
在溶解(jie)過程(cheng)中需不(bu)斷輕輕搖晃均(jun)勻(yun)(小心勿(wu)造(zao)成氣泡),使溫度與成分均(jun)一,減少沉淀(dian)的發(fa)生。切勿(wu)直接將血清從(cong)-20℃進入(ru)37℃解(jie)凍(dong),這樣因溫度改變太大,容(rong)易造(zao)成蛋白質(zhi)凝集而出現(xian)沉淀(dian)。
4、一般廠商提供(gong)的血清為(wei)無菌,無需再過(guo)濾(lv)除菌,如發(fa)現(xian)血清有懸(xuan)浮(fu)物,則可將血清加入(ru)培(pei)養液內一起過(guo)濾(lv),切勿直接(jie)過(guo)濾(lv)血清。
5、血清(qing)中的(de)(de)沉淀物(wu)(wu) 絮狀(zhuang)物(wu)(wu):主要(yao)是血清(qing)中的(de)(de)脂(zhi)蛋白變性及(ji)解凍后(hou)血清(qing)中纖維蛋白造(zao)成,這(zhe)些絮狀(zhuang)物(wu)(wu)不會影響血清(qing)本身的(de)(de)質量。可(ke)用離心(xin)3000rpm,5分鐘去除,也可(ke)不用處理。
顯微鏡下(xia)“小黑(hei)點(dian)":經過(guo)熱處(chu)理過(guo)的血(xue)清,沉(chen)淀物的形成(cheng)會(hui)顯著增多。有些(xie)沉(chen)淀物在(zai)顯微鏡下(xia)觀察象(xiang)“小黑(hei)點(dian)",常誤認為(wei)血(xue)清受污染。
一(yi)般情況下,此(ci)小黑點(dian)不會影響細胞生長,但如果懷(huai)疑血(xue)清質量(liang),則應立即停止(zhi)使(shi)用,更(geng)換另一(yi)批號的血(xue)清。
6、切勿將血清在(zai)37℃放置太久(jiu),否則血清(qing)會變得渾濁,同時血清(qing)中(zhong)的有(you)效(xiao)成分會破會而影響血清(qing)質量。
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